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c18色譜柱在日常清洗中可分為兩種情況進(jìn)行

更新時(shí)間:2020-08-10        閱讀:2930
  c18色譜柱以全覆蓋的鍵合硅膠為填料,具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。*的單官能團(tuán)化學(xué)鍵合技術(shù)可避免形成復(fù)合的c18分子層。均勻的涂層確保了固定相具有高選擇性和高效率的分離特點(diǎn)。

  c18色譜柱使用:
  1、首先要確認(rèn)您所要分析的樣品流動(dòng)相的pH范圍是否在您的柱子的pH范圍之內(nèi),以免損壞柱子硅膠!
  2、接下來就是用你做樣品的流動(dòng)相去平衡柱子,如果您的流動(dòng)相中含有緩沖鹽溶液,在平衡柱子之前務(wù)必要先用5%的CH3OH(C2H3N)/水去過渡10倍柱體積(150x4.6mm柱子約為30ml,250x4.6mm柱子約為45ml;下同)以上,再用帶鹽的流動(dòng)相去平衡柱子足夠的時(shí)間(直到基線非常平穩(wěn)為止),之后方可進(jìn)樣分析。
  3、無論您分析何種樣品,都會(huì)由于各種原因樣品中總有部分雜質(zhì),因此建議您在進(jìn)樣前在柱子前端加接保護(hù)柱以保護(hù)您那昂貴的分析柱,或者用0.2um或 0.45um針頭過濾器過濾樣品后方進(jìn)樣分析!
 
  c18色譜柱的清洗分兩種情況進(jìn)行:
  1、如果您的樣品分析只用到一般的CH3OH,C2H3N和水的流動(dòng)相(包括流動(dòng)相里面加了點(diǎn)酸),在做完樣品后可直接用65%的C2H3N/水或者純CH3OH進(jìn)行清洗10倍柱體積即可保存(如果時(shí)間有限,可視情況在儀器能承受的范圍內(nèi)加快流速******為2ml/min);
  2、如果您的樣品分析用到了含緩沖鹽或者酸或者離子對(duì)試劑的流動(dòng)相,在做完樣品后的清洗必須按照下列2個(gè)步驟進(jìn)行清洗柱子(不論您的柱子是否可以耐純水的極性柱子還是一般的通用性柱子):
  a、***重要的步驟——用5%的C2H3N(CH3OH)/水,清洗20倍柱體積溶劑以上,1~2ml/min(根據(jù)時(shí)間自由調(diào)節(jié)流速:如果因?yàn)闀r(shí)間來不及而清洗不了那么長時(shí)間,可以適當(dāng)加大流速,比如1.5 or 2ml/min;LC/MS柱子應(yīng)以0.2~0.5ml/min的流速進(jìn)行);
  b、65~90%的C2H3N(CH3OH)/水或者純CH3OH/C2H3N,清洗5~10倍柱體積,1~2ml/min。

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